產品名稱：NXN人核氧化還原蛋白ELISA試劑盒說明書

服務：
      我們可以根據您的應用需要，比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測試劑盒，有效控制檢測試劑成本。并可提供免費代測。

優勢特點：
1.高效、靈敏、特異的抗體；
2.穩定的重復性和可靠性；
3.吸附性能好，空白值低，孔低透明度高的固相載體；
4.使用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養液、尿液、唾液等等多種標本類型；
5.節省實驗經費。 

組成及試劑配制 :
1. 酶聯板：一塊(96孔) 
2. 標準品(凍干品)：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為100 ng/ml，做系列倍比稀釋(注：不要直接在板中進行倍比稀釋)后，分別稀釋成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml，臨用前15分鐘內配制。
如配制50 ng/ml標準品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液：1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A：1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B：1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A：1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔)，實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。
7. 檢測溶液B：1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液：1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本實驗前準備：
elISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（2）血漿：
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。
（5）培養細胞
檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
（6）組織標本
切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
注意事項：
1． 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2． 濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3． 各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5 分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD 值大于標準品孔孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n 倍）后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數（×n×5）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6． 底物請避光保存。
7． 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9． 本試劑不同批號組分不得混用。
組胺(>98%,BC)質量規格：>98%,BCHistamine  人脫氧尿三1酸(DP)elISA檢測試劑盒Humandeoxyuridineiphate,DPELISAKit 96T/48T  Humanai-livercellmembraneaibody,LMAELISA試劑盒人抗肝細胞膜抗體(LMA)ELISA試劑盒規格：96T/48T

胰酶(1:4500)質量規格：酶活1:4500,BRPancreatin  大鼠同型半胱氨酸(Hcy)試劑盒 Rat Homocysteic acid,Hcy ELISA Kit  Humancarcinoembryonicaign,CEAELISAKit人癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試劑盒規格：96T/48T

枸櫞酸奧芬那君;枸酸芬那君質量規格：>98%,BROrphenadrine   英文名稱RatcarbonicanhydraseELISAKit大鼠酶(CA)規格：96T/48T  人Na+/H+交換體3(NHE3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

β-半乳糖苷酶質量規格：700u/mg，羅氏分裝β-Galactosidase  化妝品阿斯巴塘(aspaame)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20  兔乙酰膽堿酯酶(AChE)試劑盒 Rabbit Acetylcholinesterase,ACHE ELISA kit
外消旋2-羥基布洛芬rac 2-Hydroxy Ibuprofen質量規格：美國進口  稀酰胺1公斤  HumanCarboxyterminalpropeptideoftypeⅠprocollagen,PⅠCPELISAKit 人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

1-羥基布洛芬(布洛芬雜質))(非對映)1-Hydroxy Ibuprofen (Ibuprofen Impurity L)(Mixture of Diastereomers)質量規格：美國進口  RatFibrinogen,FbgELISA試劑盒大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒規格：96T/48T  humanmajorvaultprotein,MVPELISA試劑盒人主要穹窿蛋白(MVP)ELISA試劑盒規格：96T/48T

1-含氧的布洛芬1-Oxo Ibuprofen質量規格：美國進口  小鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒 ，英文名： TPA ELISA Kit  組織血紅素氧合酶(HEMEOXYGENASE)活性熒光定量檢測試劑盒20

羧酸布洛芬(非對映)Ibuprofen Carboxylic Acid(Mixture of Diastereomers)質量規格：美國進口  小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA檢測試劑盒MousecardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISAKit 96T/48T  humanhemochromatosistype2/uvenile-umanhomolog,HFE2LISAKit人青少年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關蛋白2(HFE2)ELISA試劑盒規格：96T/48T
米托蒽醌Mitoxantrone質量規格：HPLC>97%,BR  飲料尿素比色法定量檢測試劑盒20  馬流感病毒H3N8型(EIV-H3N8)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

拉莫三嗪 Lamotrigine質量規格：>98%,BR  MouseLaminin,LNELISAKit小鼠層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒規格：96T/48T  HumanPodocalyxin,PCXELISA試劑盒人足細胞標記蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA試劑盒規格：96T/48T

（標準品）Coumarin質量規格：HPLC≥98%，標準品  小鼠氧化型谷胱甘肽(GSSG)ELISA試劑盒 ，英文名： GSSG ELISA Kit  ELISAKitGH魚類促性腺釋放規格：48T/96T

茜素Alizarin質量規格：HPLC≥98%，標準品  小鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA檢測試劑盒MouseCaspase-9,Casp-9ELISAKit 96T/48T  HumancaneousTcell-atactingchemokine,CTACKELISAKit人皮膚T細胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA試劑盒規格：96T/48T
NXN人核氧化還原蛋白ELISA試劑盒說明書操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。